| 热休克肿瘤细胞抗原负载的树突状细胞瘤苗对原位接种结肠肿瘤的免疫预防作用 |
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目的: 研究热休克肿瘤细胞抗原负载的树突状细胞的体内抗肿瘤作用以及对原位接种结肠肿瘤小鼠的免疫保护作用.
方法: 肿瘤细胞CT-26经热休克处理后制备冻融抗原，体外负载树突状细胞，免疫同源小鼠(热休克组).以IFN-g ELISPOT实验、LDH释放实验检测小鼠体内肿瘤特异性T细胞免疫反应，以原位接种结肠肿瘤的体积以及荷瘤小鼠的生存时间来评价该树突状细胞瘤苗对结肠原位接种CT-26小鼠的免疫保护作用，并与非热休克肿瘤细胞抗原负载的树突状细胞的免疫效果(非热休克组)作一比较. |
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| 乙型肝炎患者HBcAg特异性细胞毒性T细胞的检测及其与临床疾病状态的关系 |
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| 【摘要】 目的 通过定量分析HLA-A*2402限制性的乙型肝炎病毒(HBV)特异性的细胞毒性T细胞(CTL)来研究急性自限性和慢性持续性乙型肝炎患者体内免疫反应的差异。 方法 从急性和慢性乙型肝炎感染患者外周血中提取外周血单个核淋巴细胞（PBMC），用HLA-A*2402-HBV肽链四聚体复合体染色后，用流式细胞仪检测HBV特异性CTL细胞。同时使用酶联免疫斑点法来检测部分患者的CTL细胞分泌干扰素(IFN)-γ的水平。
结果? 在7例急性乙型肝炎的急性期，可以检测到高水平的HBV特异性的CTL细胞，而在急性乙型肝炎的恢复期，HBcAg特异性CTL细胞的水平可以明显下降。在13例慢性乙型肝炎患者中，除了1例慢性肝炎急性暴发患者之外，均不能检测到HBcAg特异性CTL细胞。IFN-γ的分泌与这些结果相一致。结论 HBcAg特异性CTL细胞在急性肝炎患者清除乙型肝炎病毒的过程中可能起到至关重要的作用 |
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| 人肾癌组织中热休克蛋白gp96-肽复合物提取、纯化及体外的免疫效应 |
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| 摘 要：目的建立从人肾癌组织中提取、纯化热休克蛋白(HSP)gp96-肽复合物的方法,并检测其体外免疫效应.方法采取三步蛋白纯化法从人肾癌患者肿瘤组织中提取、纯化HSPgp96-肽复合物,SDS-PAGE、Western blot鉴定HSPgp96-肽复合物.应用酶联免疫斑点(ELISPOT)法检测HSPgp96-肽复合物、单纯多肽产生γ-干扰素效应T细胞频数的体外免疫活性.结果应用该方法提取的蛋白质经SDS-PAGE和Western blot特异性鉴定,证实是HSPgp96-肽复合物;蛋白得率为每g湿重肾癌组织可纯化HSPgp96-肽复合物40～60 μg.γ-干扰素 ELISPOT检测,HSPgp96-肽复合物组产生γ-干扰素效应T细胞频数最高(287.50±22.34),以后依次为单纯多肽组(135.25±12.80)、阳性对照组组(102.25±14.76)、阴性对照组(35.50±11.10),各组与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);HSPgp96-肽复合物组与单纯多肽组、阳性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);单纯多肽组与阳性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论三步蛋白纯化法不仅操作简便、重复性高,而且提取的HSPgp96-肽复合物具有高获率、高纯度、高特异性及高免疫效应等优点. |
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| 人肾癌组织中热休克蛋白gp96-肽复合物提取、纯化及体外的免疫效应 |
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| 摘 要：目的建立从人肾癌组织中提取、纯化热休克蛋白(HSP)gp96-肽复合物的方法,并检测其体外免疫效应.方法采取三步蛋白纯化法从人肾癌患者肿瘤组织中提取、纯化HSPgp96-肽复合物,SDS-PAGE、Western blot鉴定HSPgp96-肽复合物.应用酶联免疫斑点(ELISPOT)法检测HSPgp96-肽复合物、单纯多肽产生γ-干扰素效应T细胞频数的体外免疫活性.结果应用该方法提取的蛋白质经SDS-PAGE和Western blot特异性鉴定,证实是HSPgp96-肽复合物;蛋白得率为每g湿重肾癌组织可纯化HSPgp96-肽复合物40～60 μg.γ-干扰素 ELISPOT检测,HSPgp96-肽复合物组产生γ-干扰素效应T细胞频数最高(287.50±22.34),以后依次为单纯多肽组(135.25±12.80)、阳性对照组组(102.25±14.76)、阴性对照组(35.50±11.10),各组与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);HSPgp96-肽复合物组与单纯多肽组、阳性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);单纯多肽组与阳性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论三步蛋白纯化法不仅操作简便、重复性高,而且提取的HSPgp96-肽复合物具有高获率、高纯度、高特异性及高免疫效应等优点. |
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| Tetramer和Elispot方法在评价特异性HIV-1细胞免疫反应中的应用和临床意义 |
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| 摘 要：目的建立从人肾癌组织中提取、纯化热休克蛋白(HSP)gp96-肽复合物的方法,并检测其体外免疫效应.方法采取三步蛋白纯化法从人肾癌患者肿瘤组织中提取、纯化HSPgp96-肽复合物,SDS-PAGE、Western blot鉴定HSPgp96-肽复合物.应用酶联免疫斑点(ELISPOT)法检测HSPgp96-肽复合物、单纯多肽产生γ-干扰素效应T细胞频数的体外免疫活性.结果应用该方法提取的蛋白质经SDS-PAGE和Western blot特异性鉴定,证实是HSPgp96-肽复合物;蛋白得率为每g湿重肾癌组织可纯化HSPgp96-肽复合物40～60 μg.γ-干扰素 ELISPOT检测,HSPgp96-肽复合物组产生γ-干扰素效应T细胞频数最高(287.50±22.34),以后依次为单纯多肽组(135.25±12.80)、阳性对照组组(102.25±14.76)、阴性对照组(35.50±11.10),各组与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);HSPgp96-肽复合物组与单纯多肽组、阳性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);单纯多肽组与阳性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论三步蛋白纯化法不仅操作简便、重复性高,而且提取的HSPgp96-肽复合物具有高获率、高纯度、高特异性及高免疫效应等优点. |
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